细胞周期的调控系统与细胞增殖密切相关。一个细胞产生两个子细胞的细胞分裂是细胞周期的一部分。细胞周期可以通过流式细胞术测量细胞DNA染色，然后分析染色细胞核在细胞周期阶段的比例来分析。细胞周期分为两个主要阶段：间期和有丝分裂（M）期。间期由G1期（发生在细胞分裂之前的DNA合成准备）、S期（DNA合成和复制）和G2期（具有重复染色体的单个细胞）组成。M期包括有丝分裂和胞质分裂。细胞周期的进展受细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶的调控。分析细胞周期检查点的作用机制，对确定抗癌药物及其他药物的作用具有重要意义

产品特点：检测时间短

碘化丙啶（PI）通常用于使用流式细胞仪进行细胞周期分析。与这种分析方法相比，深红色细胞周期测定溶液具有良好的膜渗透性，并使用对DNA具有高特异性的染料，因此仅需将试剂添加到细胞悬液中就可以分析细胞周期。此外，深红色细胞周期测定解决方案中还提供了633 nm激光器，使您可以同时使用高度通用的488 nm激光器。

对比实验：准确的判段活细胞的细胞周期

用细胞周期流式检测试剂（蓝色和深红色）染色的活CHO细胞，同时使用广泛应用的PI染色产品和同仁已有的细胞周期检测试剂盒，进行了类似的实验。结果，通过细胞周期流式检测试剂获得的结果与PI染色结果相同（如下所示）。与四种不同的产品相比，我们的产品在活细胞中获得了清晰的直方图峰。

示例：抗癌剂引起的细胞功能的变化

阿霉素（DOX）在细胞周期的G2 / M期抑制细胞增殖，并诱导细胞衰老。将DOX加入A549细胞后，G2 / M期的峰值增高（Cell Cycle Assay Solution Deep Red、Blue;C548C549），诱导细胞衰老（Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal；SG03）和线粒体膜电位发生变化（JC-1 MitoMP Detection Kit；MT09)

1)細胞（HCAECs）

N. Sasaki, Y. Itakura and M. Toyoda, “Rapamycin promotes endothelial-mesenchymal transition during stress-induced premature senescence through the activation of autophagy”, Cell Commun. Signal, 2020, 18(1), 43

2)細胞（ARPE-19）

T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, “Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

2)細胞（MIA PaCa-2）

N. Sasaki, F. Gomi, F. Hasegawa, K. Hirano, M. Fujiwara, M. Toyoda　and T. Ishiwata, “Characterization of the metastatic potential of the floating cell component of MIA PaCa-2, a human pancreatic cancer cell line”, Biochem. biophys. res. commun, 2020, 522(4), 881-888

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凑单关联产品TOP5

NO.1.    Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit    细胞凋亡检测

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  DNA含量分析在流式细胞检测中，占有相当大的比例。通过这种方法，研究者可以进行抗癌药物的毒性评估，并对恶性肿瘤细胞的预后效果及进展程度进行分析。在细胞周期检测中，DNA含量也同样作为重要的分析手段而被广泛应用。通过细胞DNA含量的测定，可计算各细胞周期的百分率，也可通过DNA片段化检测、DNA双染标记等方法检测细胞凋亡。

Cell Cycle Assay Kit-PI/RNase Staining试剂盒，可快速完成细胞周期的分析，操作简便。本产品使用碘化丙啶 (PI) 作为DNA荧光染料，通过流式细胞术得到细胞周期中G0/G1，G2和S期细胞的比例。

– 流式细胞仪（碘化丙啶PI:λex=535 nm，λem=617 nm）

– 37℃培养箱

– PBS缓冲液

– 1.5 ml微量管

– 100-1000 μl、20-200 μl、2-20 μl移液器

本产品在固定细胞及不细胞固定的情况下皆可使用。

配置Working solution (1 sample)

取500 μl Assay Buffer 后，分别加入25 μl PI Solution和2.5 μl RNase Solution。

＊工作液易遇光分解，请在使用前立即配置并用铝箔纸包裹避光保存。

配置好的工作液1天内用完。

非固定细胞

1. 将细胞密度调整为1-5×10⁶cells/ml ^a)。

2. 取1 ml的细胞悬液加入到1.5 ml微型管中，在1,000×g离心3 min ^b)。

3. 去除上清液后加入1 ml PBS缓冲液清洗细胞，在1,000×g离心3 min。

4. 去除上清液后加入0.5 ml Working Solution。

5. 在4℃避光培养30 min。

6. 涡旋振荡使细胞分散，在37℃避光培养30 min。

7. 涡旋振荡使细胞分散，用尼龙筛网过滤，以去除样品中的细胞团块 ^c)。

8. 用流式细胞仪检测。

a) 贴壁细胞用胰蛋白酶-EDTA消化细胞后，用PBS洗涤并离心收集细胞。

b) 根据不同的细胞种类，需适当调整转速与离心时间。

c) 样品处理后，剩余部分无法继续保存并使用。

固定细胞

1. 将细胞密度调整为1-5×10⁶cells/ml ^a)。

2. 取1 ml的细胞悬液加入到1.5 ml微型管中，在1,000×g 离心3 min。

3. 去除上清，并在细胞团中加入1 ml的-20℃保存的70%乙醇。

4. 涡旋振荡使细胞分散，在4℃下静置2 h ^b)。

5. 在1,000×g 离心3 min后，去除乙醇 ^c)。

6. 加入1 ml PBS缓冲液清洗细胞，在1,000×g 离心3 min。

7. 去除上清液后加入0.5 ml Working Solution。

8. 涡旋振荡使细胞分散，在37℃避光培养30 min。

9. 涡旋振荡使细胞分散，在4℃避光培养30 min。

10. 涡旋振荡使细胞分散，用尼龙筛网过滤，以去除样品中的细胞团块 ^d)。

11. 用流式细胞仪检测。

a) 贴壁细胞用胰蛋白酶-EDTA消化细胞后，用PBS洗涤并离心收集细胞。

b) 根据不同的细胞种类，需适当调整固定时间。

c) 根据不同的细胞种类，需适当调整转速与离心时间。

d) 样品处理后可以在4℃以下保存并继续使用，但是保存时间长短与细胞种类有关。