关于Duolink® PLA产品的常规问题解答

一、邻位连接适用的最短和最长距离是多少？
所有的Duolink® PLA产品都是被设计用于邻位检测的。当使用二抗方法时，理论上在两种靶标蛋白（表位）间产生信号的最长距离为40 nm。这些数据是基于抗体的平均直径约为10 nm而计算出来的。Duolink® PLA理论上可检测距离在0 nm之内的两个表位，只要两种单抗可发生结合并且不存在位阻。

二、Duolink® PLA产品或试剂可持续多久？

1.检测试剂盒中的所有试剂必须总是被保存在-20 °C。这一点对于连接酶和聚合酶尤为重要，它们如果被拿出冰箱后需要被保存在预冷的冷冻模块中（冷冻模块可保持酶处在-20 °C；而冰浴并不能实现这一点）。Duolink® PLA探针、抗体稀释液、封闭液以及封片液必须被保存在+4 °C。不要将PLA探针或由Probemaker生成的探针进行冷冻。

2.只要保存在-20 °C，我们可在您收到Duolink® PLA Probemaker后提供6个月的保障。一旦发生偶联后，我们的经验是绝大多数抗体在+4 °C的有效期为三至六个月。这种情况下，它将非常依赖于抗体是否需要特殊的保护剂。

三、是否可以将Duolink® PLA用于活细胞或非固定的组织样品？

1.Duolink® PLA一直是针对固定细胞和组织而优化的。

2.通透化对于抗体和探针找寻到其靶标是必需的。

3.此外，一些Duolink® PLA试剂（酶、DNA寡核苷酸）可能会被活细胞中活性机制所摧毁。

四、是否可以将PLA探针与传统的免疫荧光结合使用？

是的。  只要所有的抗体来自不同的物种并且荧光检测系统使用的是不同颜色的荧光，就可以将Duolink® PLA探针与传统的免疫荧光技术结合使用。