在对骨碱性磷酸酶进行检测的方法及注意细节介绍

在对骨碱性磷酸酶进行检测的方法及注意细节介绍

  骨碱性磷酸酶全称叫骨源性碱性磷酸酶即为NBAP.骨碱磷酸酶(NBAP)是成骨细胞的表型标志物之一,它可直接反映成骨细胞的活性或功能状况,是近年来主要用于小儿佝偻病早期诊断和亚临床鉴别的特异性参考指标,也是目前用于评价人体骨矿化障碍的佳指标。
  碱性磷酸酶与骨钙化作用密切相关,此酶的活性在胚胎期和骨骼发育期以及钙化过程中均有一致关系。骨碱磷酸酶主要见于骨化的软组织中,不见于无钙化的软骨中。此酶系成骨细胞所产生,当成骨细胞转变为骨细胞时,此酶活性逐渐降低。
  骨碱性磷酸酶进行检测的方法及注意细节如下:
  1、首先是血球和血浆的分离,这一过程是基于全血样品经过血浆分离器将血球截留在分离器的血球容纳膜上,而血浆渗滤穿过转运膜到达反应膜的特定区域,血浆分离完成后,将血浆分离器从反应装置上取下。
  2、是本产品与血浆中其它组分,包括其它来源的碱性磷酸酶(ALP)分离达到特异测定骨碱磷酸酶的目的。这一目的实现是根据小儿型骨碱磷酸酶(N骨碱磷酸酶)和成人骨碱磷酸酶(A骨碱磷酸酶)分子结构中糖基类型的不同,分别选择相应的亲和素,我们可称之为N骨碱磷酸酶-结合蛋白和A骨碱磷酸酶-结合蛋白,预先固相在反应膜的特定区域—反应区上。当血浆经过此区域渗滤时,骨碱磷酸酶即被结合,而其它组成滤过或被滴加的洗涤液清洗掉,从而完成特异性亲和反应。
  3、方可进行骨碱性磷酸酶的活性测定显色反应。反应膜固定在反应滑板上,待亲和反应完成后,将反应滑板推动,使反应膜到达反应孔正中,将显色液滴加到反应孔内的反应膜上,在37℃反应一定时间,酶促反应显色的深浅与骨碱磷酸酶活性成正比,对照说明书上的标准色板目测判读骨碱磷酸酶活性。