Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)  磺基琥珀酰亚胺生物素

Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)  磺基琥珀酰亚胺生物素 货号: MM3713-50MG 品牌: Jinpan 标签: 二抗

描述

Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)
磺基琥珀酰亚胺生物素

 

搜索关键词

Sulfo-NHS-Biotin;Sulfo-NHS;NHS N-羟基琥珀酰亚胺; Sulfo-SMCC;异型双功能交联剂;NHS酯(胺基指向);CAS NO:6066-82-6;CAS NO:119616-38-5;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)

Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素

MM3713-25MG 25mg 753
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-50MG 50mg

1153

Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-100MG 100mg

2053

产品描述

磺基琥珀酰亚胺生物素(Sulfosuccinimidyl Biotin, Sulfo-NHS-Biotin)适用于快速、有效的标记抗体、蛋白和其它含伯胺分子。Sulfo-NHS-Biotin具水溶性、膜非渗透性两大特征,特别适用于标记细胞表面蛋白。细胞表面生物素化已成为一种重要的工具,用来研究受体和转运体的表达和调控、区分细胞质膜蛋白和定位在细胞器膜上的蛋白,以及极化上皮细胞的膜蛋白分布,等等。由于Sulfo-NHS-Biotin容易溶于极性溶液,琥珀酰亚胺环上的磺酸钠基团使其带电荷从而不能穿透细胞膜。只要细胞维持完整性,则仅有暴露在细胞表面的伯胺才能与其反应,从而将蛋白生物素化。

水不溶性版的Sulfo-NHS-Biotin是NHS-Biotin(Cat#:MM3705),是广泛使用的生物素化试剂,两者的工作原理相同,:在生理至弱碱性缓冲液(pH 7-9)中,NHS-Biotin与伯胺(-NH2)反应形成稳定的酰胺键。蛋白(包括:抗体)通常含几种可作为标记靶标的伯胺,包括赖氨酸残基的侧链和每条多肽的N末端。我司提供几种不同的生物素-NHS酯,具有不同的物理特性和臂长,包括:NHS-LC-Biotin、Sulfo-NHS-LC-Biotin。

产品特性

化学名:1-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoyloxy]-2,5- dioxopyrrolidine-3-sulfonate sodium
同义名:Sulfosuccinimidobiotin; Sulfosuccinimidyl biotin; Biotin 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt; N-hydroxysulfosuccinimidyl biotin; N-hydroxysulfosuccinimido biotin; Water-Soluble Biotin-NHS;生物素N-羟基磺基琥珀酰亚胺酯;生物素N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐;N-羟基磺酸基琥珀生物素;
CAS NO:119616-38-5 分子式:C14H18N3NaO8S2
分子量:443.4 g/mol 间隔臂长:13.5 Å
外观:粉末 纯度:≥98% HPLC
溶解性:溶于水(≥20mg/ml、需超声助溶)、DJPO(≥10mg/ml)、不溶于乙醇
化学结构式:Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)  磺基琥珀酰亚胺生物素

保存与运输方法

保存:-20℃密封干燥保存,至少2年稳定。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 1 Sulfo-NHS-Biotin对湿度敏感,需置于-20℃密封干燥保存。避免处理产品过程中受潮,务必开盖前将本品平衡至室温。

2) 务必于使用前在溶解粉末,由于NHS酯官能团非常容易水化,从而失去反应性。因此,不要配制用来保存的储存液,丢弃任何未用完的溶液。

3) 避免使用含伯胺的缓冲液(比如:Tris、甘氨酸),这些成分会竞争性排挤目的反应。如有必要,通过透析或脱盐的方式来更换成不含伯胺的反应缓冲液比如:PBS。

4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤(溶液内生物素化蛋白)

1. 计算

生物素标记率取决于蛋白上氨基分布、蛋白浓度和试剂用量。与高浓度蛋白参与的反应相比较,低浓度蛋白参与的反应需要更高摩尔过量的生物素试剂,以达到相同的标记水平。使用20倍摩尔过量生物素试剂来标记1-10mg/ml抗体(体积:0.5-2ml)的得率,是每个抗体上标记4-6个生物素基团。使用50倍摩尔过量生物素试剂标记50-200μg抗体(0.2-0.7ml)的得率,是每个抗体上标记1-3个生物素基团。需调整Sulfo-NHS-Biotin与蛋白的摩尔比率来获取理想的插入率。

A.计算加入反应体系所需生物素试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)的毫摩尔(millimoles)(20倍摩尔过量)

 

B.计算加入反应体系得到10mM生物素试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)所需的微升量(μl,microliters)

 

2. 生物素标记反应

2.1 从冰箱取出生物素试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin),开盖前平衡至室温。

2.2 根据1计算所得,准备溶于PBS的蛋白溶液。

2.3 使用前,配制10mM生物素试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)。

2.4 加入适量体积的10mM生物素试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)到蛋白溶液。

2.5 冰上孵育2h或室温孵育30min。

2.6 此时蛋白标记完成,溶液内虽有过量未反应和水解的生物素试剂,但通常情况下,此时标记好的蛋白可以进行后续的ELISA或WB实验。一旦确认好标记蛋白的功能,再通过脱盐或透析的方法来纯化标记蛋白。

操作步骤(生物素化细胞表面蛋白)

1. 用预冷PBS(pH 8.0)清洗细胞三次,以去除任何含胺培养基和分泌蛋白。

2. 用PBS(pH 8.0)重悬细胞使其浓度为~25×106细胞/ml。

3. 按照1ml细胞悬液加入1mg Sulfo-NHS-Biotin(得到~2mM生物素试剂)。或,按照1ml细胞悬液加入200μl 10mM生物素试剂。

4. 室温孵育30min。【注意】:4℃孵育可能减低生物素试剂的内在化反应。

5. 用PBS(pH 8.0)+100mM甘氨酸清洗细胞三次以淬灭和去除过剩的生物素试剂和副产物。

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货号 名称 规格
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