重组胰蛋白酶（RTrypsin）

◆概述

胰蛋白酶（Trypsin; EC 3.4.21.4）是一种丝氨酸蛋白酶，酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致，分子量为24 kDa，最适pH为7.0-9.0。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中，如：重组胰岛素生产；细胞培养、细胞发酵；蛋白质的酶解、测序；各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制，金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

 

◆优势

●　批量生产规模大，批间小

●　高纯度，高比活性

●　重组表达生产，无外源性病毒污染，生产过程不使用动物来源原料

 

◆纯度

SDS-PAGE显示纯度＞95%。

 

◆来源

重组毕赤酵母菌株，其克隆有来自猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因。

 

◆使用方法

保存：10 mmol/L HCl，20 mmol/L CaCl2；溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系：25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。

推荐使用量：蛋白酶：融合蛋白质量比1：20~1：100（肽图或蛋白组学研究），1：200~1：2000（多肽/蛋白生产工艺）。

 

◆保存条件

储存稳定性：冻干粉存于-15 ℃以下，24个月稳定；10 mmol/L HCl，20 mmol/L CaCl₂溶解后分装储存于-15 ℃以下，反复冻融5次，未能观察到活性损失；溶解后2~8 ℃保存建议不超过7 d。

运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定

 

◆应用实例

 

RTrypsin特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK，蛋白酶：合成多肽质量比1：100，37 ℃酶切反应10 min，LC-MS验证酶切反应特异性。

Peak#	R.T.	M.W.	Sequence
Peak 1	6.70 min	366.42	YGK
Peak 2	7.61 min	552.6	YGKR
Peak 3	17.67 min	445.56	LWK
Peak 4	19.53 min	601.75	RLWK
Peak 5	19.97 min	950.15	YGKRLWK

◆产品信息

产品编号	产品名称	规格	比活
RTP0102	RTrypsin	10 mg	3800 USP/mg
RTP0103	RTrypsin	1 mg	3800 USP/mg
RTP0104	RTrypsin	10 μg	3800 USP/mg

◆相关产品

产品编号	产品名称	规格	储存温度	其他信息
MDRK0101	RTrypsin  ELISA Kit 重组胰蛋白酶检测试剂盒	96 孔	2～8 ℃	检测范围 4.0～250 ng/mL
IRTP0101	immobilized Recombinant Trypsin 固定化重组胰蛋白酶	1.0 mL	-15 ℃以下	1.0 mL含1.0 mg