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LabAssay™ Triglyceride
LabAssay™ 甘油三酯检测试剂盒
甘油三酯是由１分子甘油和３分子脂肪酸通过酯键结合而成的中性脂肪。甘油三酯、胆固醇、磷脂、游离脂肪酸和脂溶性维生素作为脂溶性物质存在于血液中。
本产品采用基于N-乙基-N-（２-羟基-３-磺丙基）-３,５-二甲氧基苯胺钠（DAOS）的蓝色显色酶法。通过微孔板法，可检测小鼠血清中甘油三酯的含量，亦可检测人血清中的甘油三酯。
◆检测原理
样品中的甘油三酯在脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase，简称LPL）的作用下，分解为甘油和脂肪酸。生成的甘油在ATP存在下，通过甘油激酶（GK）的作用，转化为３-磷酸甘油。生成的3-磷酸甘油在3-磷酸甘油氧化酶（glycerol-３-phosphate oxidase，简称GPO）的作用下被氧化，同时生成过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，定量氧化缩合DAOS和４-氨基安替比林，产生蓝色色素。通过测定这种蓝色色素的吸光度，可计算样品中甘油三酯的浓度。
◆试剂盒组成
１．缓冲液（50 mmol/L Good’s buffer（PIPES）、pH=6.5）——105 mL×1瓶
２．显色剂（色原底物）——105 mL用×1瓶
３．标准液（31.2 mg/dL甘油）——4 mL×1瓶
◆试剂盒性能
● 标准曲线范围——100～888 mg/dL（mg/100mL）
● 检测时间——约10 min
● 样品——血清、血浆（小鼠、大鼠、人）
● 样品量——2 μL
● 测定波长——主波长600 nm、 副波长700 nm
◆标准曲线示例
◆检测操作方法
|
样品 |
标准 |
空白 |
|
|
显色剂 |
300 μL |
300 μL |
300 μL |
|
待测物 |
样品 2 μL |
标准溶液 2 μL |
－ |
|
充分混合、在37℃加热５min。以空白为对照，测定600 nm※ 处样品和标准溶液的吸光度。 |
|||
※ 双波长检测时，主波长600 nm／副波长700 nm。
◆数据
添加回收测试
人样品
|
样品 |
添加量（mg/dL） |
实测值（mg/dL） |
回收量（mg/dL） |
回收率（%） |
|
血清 |
－ |
126 |
－ |
－ |
|
145 |
267 |
141 |
97.2 |
|
|
218 |
323 |
196 |
89.9 |
|
|
291 |
389 |
263 |
90.4 |
|
|
363 |
455 |
329 |
90.6 |
|
|
血浆（EDTA） |
－ |
136 |
－ |
－ |
|
150 |
276 |
140 |
93.3 |
|
|
225 |
329 |
193 |
85.8 |
|
|
300 |
414 |
278 |
92.7 |
|
|
374 |
460 |
324 |
86.6 |
|
|
血浆（肝素） |
－ |
135 |
－ |
－ |
|
150 |
269 |
134 |
89.3 |
|
|
226 |
320 |
186 |
82.3 |
|
|
301 |
394 |
260 |
86.4 |
|
|
376 |
457 |
322 |
85.6 |
小鼠样品
|
样品 |
添加量（mg/dL） |
实测值（mg/dL） |
回收量（mg/dL） |
回收率（%） |
|
血清 |
－ |
133 |
－ |
－ |
|
129 |
268 |
136 |
105 |
|
|
194 |
342 |
209 |
108 |
|
|
258 |
409 |
276 |
107 |
|
|
323 |
448 |
315 |
97.5 |
|
|
血浆（EDTA） |
－ |
139 |
－ |
－ |
|
129 |
288 |
149 |
116 |
|
|
193 |
342 |
203 |
105 |
|
|
258 |
409 |
270 |
105 |
|
|
322 |
446 |
307 |
95.3 |
|
|
血浆（肝素） |
－ |
151 |
－ |
－ |
|
132 |
292 |
141 |
107 |
|
|
198 |
349 |
198 |
100 |
|
|
264 |
423 |
272 |
103 |
|
|
329 |
442 |
291 |
88.4 |
大鼠样品
|
样品 |
添加量（mg/dL） |
实测值（mg/dL） |
回收量（mg/dL） |
回收率（%） |
|
血清 |
－ |
130 |
－ |
－ |
|
131 |
257 |
127 |
97 |
|
|
196 |
307 |
177 |
90.3 |
|
|
262 |
370 |
240 |
91.6 |
|
|
327 |
413 |
283 |
86.5 |
|
|
血浆（EDTA） |
－ |
128 |
－ |
－ |
|
135 |
256 |
128 |
94.8 |
|
|
203 |
312 |
183 |
90.1 |
|
|
271 |
374 |
245 |
90.4 |
|
|
338 |
401 |
272 |
80.5 |
|
|
血浆（肝素） |
－ |
123 |
－ |
－ |
|
134 |
257 |
134 |
100 |
|
|
201 |
305 |
182 |
90.5 |
|
|
268 |
365 |
242 |
90.3 |
|
|
335 |
400 |
278 |
83 |
◆样品检测示例
人血清样品
|
测定值（mg/dL） |
平均值 |
SD |
CV（%） |
||
|
人血清 |
123 |
129 |
126 |
4.2 |
3.3 |
|
人血浆（EDTA） |
137 |
135 |
136 |
1.3 |
0.92 |
大鼠血清
|
序号 |
测定值（mg/dL） |
平均值 |
SD |
CV（%） |
|
|
1 |
54.5 |
53.1 |
53.8 |
1 |
1.9 |
|
2 |
153 |
153 |
153 |
0.41 |
0.27 |
|
3 |
105 |
95.8 |
100 |
6.4 |
6.3 |
|
4 |
120 |
125 |
123 |
4.1 |
3.4 |
|
5 |
102 |
107 |
104 |
3.7 |
3.5 |
大鼠血浆（EDTA）
|
序号 |
测定值（mg/dL） |
平均值 |
SD |
CV（%） |
|
|
1 |
56.8 |
64.3 |
60.6 |
5.3 |
8.8 |
|
2 |
73.2 |
67.2 |
70.2 |
4.3 |
6.1 |
|
3 |
95.1 |
85.5 |
90.3 |
6.8 |
7.5 |
|
4 |
68.5 |
63.8 |
66.2 |
3.3 |
5 |
|
5 |
76.2 |
68.9 |
72.5 |
5.1 |
7.1 |
小鼠血清
|
序号 |
测定值（mg/dL） |
平均值 |
SD |
CV（%） |
|
|
1 |
80.8 |
77.9 |
79.3 |
2 |
2.6 |
|
2 |
78.4 |
76.7 |
77.6 |
1.2 |
1.6 |
|
3 |
81.3 |
75.6 |
78.4 |
4.1 |
5.2 |
|
4 |
57.4 |
60.3 |
58.8 |
2 |
3.5 |
|
5 |
48.7 |
53.3 |
51 |
3.3 |
6.4 |
小鼠血浆（EDTA）
|
序号 |
测定值（mg/dL） |
平均值 |
SD |
CV（%） |
|
|
1 |
28.8 |
31.7 |
30.2 |
2 |
6.7 |
|
2 |
132 |
145 |
139 |
9.5 |
6.9 |
|
3 |
62.7 |
68 |
65.4 |
3.8 |
5.8 |
|
4 |
29.5 |
25.8 |
27.6 |
2.6 |
9.5 |
|
5 |
58.8 |
55.1 |
56.9 |
2.7 |
4.7 |
◆稀释线性度测试
人血清
大鼠血清
小鼠血清
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※ 产品已更新，旧编号为：290-63701
参考文献
|
1. |
Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291 (2015). ※大鼠肝组织提取物 |
|
2. |
Funakoshi, T. et al. : Biochem. Biophys. Rep., 13, 39 (2018). ※大鼠原代肌肉卫生细胞 |
|
3. |
Moser, V. A. and Pike, C. J. : eNeuro, 4, e0077-17 (2017). ※小鼠血浆 |
|
4. |
Fujii, N. et al. : Aging Cell, 16, 508 (2017). ※大鼠血浆 |
|
5. |
Wang, F. et al. : J. Mol. Endocrinol., 52, 133 (2014). ※大鼠血浆 |
|
6. |
Kato, H. et al. : J. Hepatol., 60, 1032 (2014). ※小鼠肝脏提取物 |
|
7. |
Fujimori, K. et al. : Prostaglandins. Other. lipid. Mediat., 94, 96 (2011). ※小鼠培养细胞提取 |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 632-50991 | LabAssay™ Triglyceride LabAssay ™ 甘油三酯检测试剂盒 |
350 tests | for Cellbiology |