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β淀粉样蛋白-免疫组织染色试剂盒
◆阿尔兹海默症脑连续切片染色案例
淀粉样蛋白β-蛋白质(1-40)染色 | 淀粉样蛋白β-蛋白质(1-42)染色 |
图像提供:东京大学研究生院药学系研究科临床药学教室岩坪威 教授 |
◆特点
1. 通过C末端特异抗体可对淀粉样蛋白β-蛋白(1-40)和淀粉样蛋白β-蛋白(1-42)等进行特异性染色。
2. 抗体特异性高,具有高灵敏度。
◆试剂盒内容
● 抗淀粉样蛋白β-蛋白(1-40),单克隆抗体(克隆号:BA27)——7 mL×1
● 抗淀粉样蛋白β-蛋白(1-42),单克隆抗体(克隆号:BC05)——7 mL×1
● 封闭血清——10 mL×1
● 抗小鼠IgG(H+L),山羊,生物素结合——10 mL×1
● ABC溶液(链亲和素 – 生物素 – 过氧化物酶复合物溶液)——10 mL×1
● 甲酸(90%)——15 mL×1
● 胰蛋白酶,结晶——50 mg×1
◆染色方法
◆染色案例(阿尔兹海默症脑连续切片染色)
淀粉样蛋白β-蛋白质(1-40)染色 凝结的老年斑被染色 |
淀粉样蛋白β-蛋白质(1-42)染色 大多类型的老年斑均可被染色(范围广) |
◆使用注意事项
● 请检测组织最适的反应温度和反应时间。
● 在同一切片上分别对Aβ40和Aβ42染色较困难,请使用连续切片。
● 脱石蜡用到的中间剂右旋柠檬烯,二甲苯,乙醇应在每处理约30-40片载玻片时,
做一次更换,致使背景更强。
● 在染色中保持切片湿润,以免染色变弱。
● 包埋组织时,请不要使用加热至60℃以上的石蜡。
● DBA溶液可能会致癌。请谨慎使用。含有过氧化氢酶抑制剂(NaN3等)的溶液,
会溶解DAB,因此请不要使用清洗液。
参考文献
[1] Iwatsubo, T., Odaka, A., Suzuki, N., Mizusawa, H., Nukina, N.andIhara, Y.:Neuron 13,45(1994)
[2] Saido, TC., Iwatsubo, T., Mann, DMA., Shimada,H., Ihara,Y.andKawashima, S.:Neuron 14,457(1995)
[3] Odaka, A., Ishibashi,Y., Kikuchi, T., Kitada, C.and Suzuki,N.:Biochemistry 34,10272(1995)
[4] Fukumoto, H., Odaka, A., Suzuki, N., Shimada, H., Ihara,Y.andIwatsubo, T.:A.J.Pathology
[4] 148,1(1996)
[5] Fukumoto, H., Odaka, A., Suzuki, N.andIwatsubo, T.:Neurodegeneration 5,13(1996)