HisTrap HP是带有镍电荷的IMAC层析柱，用于高分辨率组氨酸标签蛋白纯化，具有高结合载量，可最大限度地回收。

产品特点

HisTrap HP预填充柱为组氨酸标记（His-tag）重组蛋白的制备纯化提供了一种快速，方便和重复性好的形式。

高分辨率:平均粒径为34μm

高载量:每毫升树脂至少可结合40毫克His标签蛋白

可忽略不计的镍泄漏:有助于保持活性和最大限度地减少蛋白质沉淀

广泛的试剂兼容性:兼容各种还原剂，去垢剂，变性剂和其他添加剂

方便的HiTrap形式:1毫升和5毫升预装柱，兼容注射器，蠕动泵或层析系统（如AKTA或其他FPLC系统）

产品维护

Ni柱的使用与保养

1. 对于一般的预装柱（Crude系列除外），上样前，样品需要使用0.22μm/0.45μm滤膜进行过滤或者离心处理，以避免样品中有细胞碎片等固体物质，堵塞柱子。

2. 如果细胞裂解后非常粘稠，需考虑是否因为DNA、RNA这类核酸物质过多，需要加入核酸酶去除，以降低样品粘稠度，提高上样速度及洗脱效果。

3. 柱子使用过程中，不能超过填料的压力，以免填料被压塌。

4.每次使用后，可使用5-10倍柱体积的纯水或者结合缓冲溶液对柱子进行清洗。（如果出现载量严重下降或者压力增加，需考虑彻底清洗）

CIP（彻底清洗）

常规柱子（除了Ni excel）如出现反压严重升高或者柱子明显颜色改变，说明柱子需要进行彻底的清洗。

1. 脱镍：

(1) 脱镍缓冲液：20mM 磷酸缓冲液，0.5M NaCl，50mM EDTA，pH 7.4。

(2) 使用5-10个柱体积的脱镍缓冲液冲洗柱子。

(3) 然后再用5-10个柱体积的水冲洗柱子。

2. 去除沉淀蛋白、疏水性蛋白及脂蛋白：将柱子置换到1M NaOH中，室温1-2小时（若需要去除内毒素可延长至12小时），再用5-10个体积去离子水冲洗。

3. 去除强离子吸附蛋白：使用1.5M NaCl洗柱子，约10-15分钟，然后用大约10个体积去离子水冲洗。