JM109 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

JM109 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

货号: MF2313-10000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

JM109 Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

 

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货号 产品名称 规格 价格(元)
MF2313-2000UL JM109 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 20×100μl 280
MF2313-10000UL JM109 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 100×100μl 1280

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产品组分:

组分编号 组分名称

货号(规格)

MF2313-2000UL       MF2313-10000UL   
MF2313-A        JM109Competent Cell 20×100μl 100×100μl
MF2313-B Control Plasmid puC19, 10pg/μl            10μl 10μl

 

菌株描述

JM109菌株来源于E.coliK Strain,具recA1和endA1突变,是细菌转化以获取高质量质粒DNA或单链噬菌体DNA的理想菌株。JM109细胞中核酸内切酶(endA1)的突变显著改善微量DNA的质量,且重组(recA1)的突变提高克隆DNA的稳定性。携带的hsdR17基因型背景能防止克隆DNA不被EcoK内切酶系统所降解。F′附加体上laqIqZΔM15基因的存在使得重组质粒能进行蓝白斑筛选。

JM109菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk–, mk+) relA1 supE44 Δ(lac-proAB) [F´ traD36 proAB laqIqZΔM15]

产品描述

本品是大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达109 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。

2)   最好在冰上融化感受态细胞。

3)   进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。

4)   为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。

5)   产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1)  从-80℃冰箱取出取感受态细胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),用手轻弹管底轻轻混匀,冰浴静置25min。

2)   42℃水浴热激45s,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3)   向每个离心管中加入700 μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养60min,目的使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。

4)   低速离心收菌(比如4000rpm,2min),留取100μl左右上清,用枪轻轻吹打重悬菌块,之后加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于室温(或37℃)直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16h。

【注意】:

a)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可不用离心,直接取少量转化产物涂布平板;反之,若转化的DNA总量较少,则通过离心(4,000 rpm,2min)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
JP0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

100×100μl

货期:

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